弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是非霍奇金淋巴瘤中最常见的亚型，约占所有病例的30%。尽管标准免疫化疗方案R-CHOP（利妥昔单抗联合环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松）的临床应用显著改善了患者预后，但仍有约40%的患者会出现复发或难治（R/R）疾病，其中位总生存期不足7个月，临床预后极差。因此，深入解析DLBCL持续耐药性的分子机制，不仅为揭示肿瘤异质性和治疗抵抗的生物学基础提供关键科学依据，更将为开发靶向干预策略、实现复发难治DLBCL患者的精准治疗突破带来重要转机。

既往在其他肿瘤的研究表明持续耐药细胞表现出增殖缓慢及代谢适应等干细胞样特性。然而，目前关于DLBCL耐药细胞中这些干细胞样特性的分子机制及其临床意义的研究仍然缺乏。该研究采用单细胞RNA测序（scRNA-seq）联合B细胞受体测序（scBCR-seq）技术，对DLBCL患者接受R-CHOP治疗前的基线样本及治疗后配对的复发/难治性样本进行系统分析。研究发现，持续耐药性DLBCL细胞呈现干细胞样（Stem-like ）转录特征，表现为“更低分化”状态。值得注意的是，在多个独立DLBCL临床队列中，这一干细胞样特征（Stem-like signature）均与患者不良临床预后显著相关。为深入验证这一发现，研究团队建立了系统的体外功能验证体系（体外克隆形成实验）和体内评估模型（基于患者来源异种移植模型的肿瘤起始实验），结果一致证实持续耐药性DLBCL细胞具有更强的克隆形成能力和肿瘤起始能力。

进一步机制解析揭示，CSNK1E的激活可能通过APRIL-TNFRSF13B介导的信号通路实现。研究团队发现，CSNK1E活性在TNFRSF13B阳性细胞中显著富集，且TNFRSF13B高表达与DLBCL患者治疗反应差和预后不良显著相关。值得注意的是，具有干性特征的持续耐药DLBCL细胞接受髓系来源的APRIL-TNFRSF13B信号增强。通过系统的体外细胞实验和体内动物模型，研究证实TNFRSF13B在维持DLBCL细胞克隆形成能力、连续传代增殖及多柔比星耐药表型中的重要作用，靶向阻断TNFRSF13B可显著抑制肿瘤起始能力。这一发现为R/R DLBCL的诊断标志物开发、预后评估体系优化以及靶向治疗策略的设计提供了重要的理论依据和应用前景。

该研究采用单细胞多组学技术对弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者的纵向样本进行系统分析，深入阐明了维持DLBCL持续耐药的关键分子机制。研究首次揭示，持续耐药性DLBCL细胞通过WNT信号通路关键调控因子CSNK1E维持其干细胞样特性，这一干细胞样特性在多个独立临床队列中均显示出显著的预后相关性。进一步研究发现，CSNK1E通过激活APRIL-TNFRSF13B信号轴，促进耐药细胞的存活和自我更新能力。值得注意的是，体内体外功能实验证实，靶向干预CSNK1E或TNFRSF13B均能有效逆转DLBCL耐药性，且与多柔比星联用可产生显著的协同治疗效果。这些重要发现不仅为理解DLBCL持续耐药机制提供了新的理论依据，更为复发难治DLBCL患者提供了潜在的新治疗策略，具有重要的临床转化前景。